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大鼠ELISA試劑盒樣品收集

日期:2024-09-20 10:45
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摘要: Elisa試劑盒為雙抗體夾心法檢測抗原RBD蛋白,酶標板采用高親和力抗RBD蛋白抗體作為包被物,檢測時酶標板孔加入待檢樣品或標準品(哺乳動物重組表達RBD蛋白),再加入生物素化抗RBD蛋白抗體,反應后加入鏈霉親和素HRP,較后加入單組份TMB底物液。 如果待檢樣品中含有RBD蛋白,TMB底物液在HRP催化下顯色,加入終止液終止顯色后,在酶標儀OD450/OD630讀取吸光值,吸光值大小與待檢測樣品中RBD蛋白濃度呈正相關(guān),根據(jù)標準品濃度/吸光值繪制的標準曲線,可計算出待檢樣品中RBD蛋白含量。 大鼠ELISA試劑盒樣品收集: ...

Elisa試劑盒為雙抗體夾心法檢測抗原RBD蛋白,酶標板采用高親和力抗RBD蛋白抗體作為包被物,檢測時酶標板孔加入待檢樣品或標準品(哺乳動物重組表達RBD蛋白),再加入生物素化抗RBD蛋白抗體,反應后加入鏈霉親和素HRP,較后加入單組份TMB底物液。 如果待檢樣品中含有RBD蛋白,TMB底物液在HRP催化下顯色,加入終止液終止顯色后,在酶標儀OD450/OD630讀取吸光值,吸光值大小與待檢測樣品中RBD蛋白濃度呈正相關(guān),根據(jù)標準品濃度/吸光值繪制的標準曲線,可計算出待檢樣品中RBD蛋白含量。

大鼠ELISA試劑盒樣品收集:


1.血清:全血樣品于室溫放置2小時或4℃過夜后于1000×g離心20分鐘,取上清即可檢測,收集血液的試管應為一次性的無熱原,無內(nèi)毒su 試管。


2.血漿:抗凝劑推薦使用EDTA-Na2,樣品采集后30分鐘內(nèi)于1000×g離心15分鐘,取上清即可檢測。避免使用溶血,高血脂樣品。


3.組織勻漿:用預冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組織,去除殘留血液(勻漿中裂解的紅細胞會影響測量結(jié)果),稱重后將組織剪碎。將剪碎的組織與對應體積的PBS(一般按1:9的重量體積比,比如1g的組織樣品對應9mL的PBS,具體體積可根據(jù)實驗需要適當調(diào)整,并做好記錄。推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑)加入玻璃勻漿器中,于冰上充分研磨。為了進一步裂解組織細胞,可以對勻漿液進行超聲破碎,或反復凍融。較后將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘,取上清檢測。


4.細胞培養(yǎng)上清:取細胞培養(yǎng)上清于1000×g離心20分鐘,除去雜質(zhì)及細胞碎片。取上清檢測。


5.其它生物樣品:1000×g離心20分鐘,取上清即可檢測。


6.樣品應清澈透明,懸浮物應離心去除。


7.樣品收集后若在1周內(nèi)進行檢測的可保存于4℃,若不能及時檢測,請按一次使用量分裝,凍存于-20℃(1個月內(nèi)檢測),或-80℃(6個月內(nèi)檢測),避免反復凍融。


8.如果您的樣品中檢測物濃度高于標準品較高值,請根據(jù)實際情況,做適當倍數(shù)稀釋(建議先做預實驗,以確定稀釋倍數(shù))。