主營(yíng)產(chǎn)品：
生化試劑，標(biāo)準(zhǔn)品,對(duì)照品，PCR試劑盒，?核酸檢測(cè)試劑盒，熒光定量檢測(cè)試劑盒，生化試劑盒?，比色法試劑盒，酶活性檢測(cè)試劑盒，ELISA試劑盒，酶聯(lián)免yi檢測(cè)試劑盒，試劑盒，ELISA試劑盒，抗體，重組蛋白，分光光度法檢測(cè)試劑盒，細(xì)胞株，原代細(xì)胞，細(xì)胞培養(yǎng)基，標(biāo)準(zhǔn)溶液產(chǎn)品。代理并銷售進(jìn)口SIGMA試劑、abcam抗體、R&D抗體、CST抗體、ATCC細(xì)胞、BD公司、GE公司、賽默飛世爾公司產(chǎn)品。
產(chǎn)品中心
PCR 出現(xiàn)無(wú)擴(kuò)增條帶問(wèn)題原因及對(duì)策
日期：2024-09-20 07:40
瀏覽次數(shù)：1532
摘要：PCR 出現(xiàn)無(wú)擴(kuò)增條帶問(wèn)題原因及對(duì)策
PCR 出現(xiàn)無(wú)擴(kuò)增條帶問(wèn)題原因及對(duì)策：
-
1、酶失活或在反應(yīng)體系中未加入酶。TaqDNA 聚合酶因保存或運(yùn)輸不當(dāng)而失活，往往通過(guò)更換新酶或用另一來(lái)源的酶以獲得滿意的結(jié)果。
-
2、模板含有雜質(zhì)。特別是對(duì)甲醛固定及石蠟包埋的組織常含甲酸，造成 DNA 脫嘌呤而影響 PCR 的結(jié)果。
-
3、變性溫度是否準(zhǔn)確：PCR 儀指示溫度與實(shí)際溫度是否相符，過(guò)高酶在前幾個(gè)循環(huán)就迅速失活；過(guò)低則模板變性不徹底。
-
4、反應(yīng)系統(tǒng)中污染了蛋白酶及核酸酶，應(yīng)在未加 Taq 酶以前，將反應(yīng)體系 95 ℃ 加熱 5~10 分鐘。
-
5、引物變質(zhì)失效。人工合成的引物是否正確。是否純化，或因儲(chǔ)存條件不當(dāng)而失活。
-
6、引物錯(cuò)誤。利用 BLAST 檢查引物特異性或重新設(shè)計(jì)引物。
-
7、DNA 凝膠電泳時(shí)加入陽(yáng)性對(duì)照，確保不是 DNA 凝膠和 PCR 程序的問(wèn)題。