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HRP底物氨乙基咔唑操作步驟
日期：2024-09-20 07:34
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摘要：
氨乙基咔唑(AEC)產(chǎn)生紅色產(chǎn)物，其敏感性低于DAB，但可用于DAB反應(yīng)產(chǎn)生較高背景或要求改變產(chǎn)物顏色的實驗。此產(chǎn)物可溶于醇，但不溶于水。
1、需要的溶液和特殊設(shè)備
0.4％ AEC用 N,N—二甲基甲酰胺(DMF)溶解， 0.1 mol/L乙酸鈉緩沖液(pH5.2)，過氧化氫， Gelvatol或Mowiol，光學(xué)顯微鏡(通常帶有照相機以便于記錄結(jié)果)。
2、 操作步驟
(1) 用 l mL DMF溶解 4 mg AEC。AEC在DMF中穩(wěn)定，因此，可以用100 mL DMF溶解0.4 g AEC作為貯存液備用；
(2) 加 l mL AEC溶液至15 mL 0.1 mol/L的乙酸鈉緩沖液...
氨乙基咔唑(AEC)產(chǎn)生紅色產(chǎn)物，其敏感性低于DAB，但可用于DAB反應(yīng)產(chǎn)生較高背景或要求改變產(chǎn)物顏色的實驗。此產(chǎn)物可溶于醇，但不溶于水。
1、需要的溶液和特殊設(shè)備
0.4％ AEC用 N,N—二甲基甲酰胺(DMF)溶解， 0.1 mol/L乙酸鈉緩沖液(pH5.2)，過氧化氫， Gelvatol或Mowiol，光學(xué)顯微鏡(通常帶有照相機以便于記錄結(jié)果)。
2、 操作步驟
(1) 用 l mL DMF溶解 4 mg AEC。AEC在DMF中穩(wěn)定，因此，可以用100 mL DMF溶解0.4 g AEC作為貯存液備用；
(2) 加 l mL AEC溶液至15 mL 0.1 mol/L的乙酸鈉緩沖液(pH5.2)中，并攪拌；
(3) 加0.15 mL 3％過氧化氫于水中。過氧化氫一般是30％的溶液提供，在4℃可存放1個月；
(4) 用濾紙過濾；
(5) 加此溶液到標本中，并于室溫孵育10～40 min，水洗終止反應(yīng)；
(6) 優(yōu)化：如果需要復(fù)染，只可用水溶性染料；
(7) 用Gelvatol或Mowiol封片。