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RNA和DNA提取

日期:2024-09-20 04:58
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摘要:RNA和DNA提取: 裂解:裂解公式可能因您要提取 DNA 還是 RNA 而異,但共同點(diǎn)是含有高濃度離液鹽的裂解緩沖液。 Chaotropes(離液劑)的作用:Chaotrope會(huì)破壞氫鍵及疏水間的相互作用。離液鹽包括鹽酸胍、硫氰酸胍、尿素和高氯酸鋰。 洗滌劑:除了離液劑外,裂解緩沖液中通常還有一些去污劑,以幫助蛋白質(zhì)溶解和裂解。 溶菌酶和蛋白酶K:根據(jù)樣品類型,也可以使用酶進(jìn)行裂解。蛋白酶 K 就是其中之一,實(shí)際上在這些變性緩沖液中效果較好;當(dāng)?shù)鞍踪|(zhì)變性增多,蛋白酶 K 的作用也會(huì)相應(yīng)增強(qiáng)。然而,溶菌酶在變性中不起作用,因...
RNA和DNA提取:
裂解:裂解公式可能因您要提取 DNA 還是 RNA 而異,但共同點(diǎn)是含有高濃度離液鹽的裂解緩沖液。

Chaotropes(離液劑)的作用:Chaotrope會(huì)破壞氫鍵及疏水間的相互作用。離液鹽包括鹽酸胍、硫氰酸胍、尿素和高氯酸鋰。

洗滌劑:除了離液劑外,裂解緩沖液中通常還有一些去污劑,以幫助蛋白質(zhì)溶解和裂解。

溶菌酶和蛋白酶K:根據(jù)樣品類型,也可以使用酶進(jìn)行裂解。蛋白酶 K 就是其中之一,實(shí)際上在這些變性緩沖液中效果較好;當(dāng)?shù)鞍踪|(zhì)變性增多,蛋白酶 K 的作用也會(huì)相應(yīng)增強(qiáng)。然而,溶菌酶在變性中不起作用,因此溶菌酶處理通常在添加變性鹽之前進(jìn)行。