注意事項:

1．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標(biāo)包被板開封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。

2．濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結(jié)果。

3．各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間zui好控制在5分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。

4．  如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高（樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔*孔的OD值），請先將樣本稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測定，計算時請zui后乘以稀釋倍數(shù)（×5×n）。

5．  封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。

6．本試劑不同批號組分不得混用。顯色劑B請避光保存。

7．嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行，試驗結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).

8．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。

9. 如與英文說明書有異，以英文說明書為準(zhǔn)

服務(wù)：所有的檢測試劑盒均免費(fèi)代測，您只需要將您準(zhǔn)備好的樣本郵寄到我司即可！本地也可以上門收取樣本！全程檢測試劑盒實驗技術(shù)指導(dǎo)，免費(fèi)代做實驗。本公司產(chǎn)品僅用于科研實驗。老客戶可享受優(yōu)惠折扣服務(wù)！

產(chǎn)品名稱：VB12植物維生素B12進(jìn)口ELISA試劑盒
英文名稱：Plant Vitamin B12,VB12 ELISA Kit

貨號：A112634

規(guī)格：96T/48T 

保存；2-8℃。

檢測目的：用于檢測血漿，血清及相關(guān)液體等樣本。例如灌洗液、腦脊液、血清、血漿、尿液、胸腹水、細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標(biāo)本.

檢測種屬：大鼠、小鼠、豚鼠、倉鼠、裸鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛、馬鈴薯、鹿、羊、雞、鴨、魚、人、等動植物。

實驗流程:

1. 實驗前標(biāo)準(zhǔn)品、試劑及樣本的準(zhǔn)備；

2. 加樣（標(biāo)準(zhǔn)品及樣本）100μL，37°C孵育1小時；

3. 吸棄，加檢測溶液A100μL，37°C孵育1小時；

4. 洗板3次；

5. 加檢測溶液B100μL，37°C孵育30分鐘；

6. 洗板5次；

7. 加TMB底物90μL，37°C孵育10-20分鐘；

8. 加終止液50μL，立即450nm讀數(shù)。

試劑和樣本的控制方法：

一、試劑

1.試劑的選擇：國家明確要求要采用批批檢定的形式對ELISA試劑嚴(yán)格把關(guān)，我司嚴(yán)格按照國家標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行生產(chǎn)，已獲得國家承認(rèn)的“三證”，每一個產(chǎn)品都有對應(yīng)的生產(chǎn)批號，只要客戶提前下單，我們就能為您提供新批次的產(chǎn)品，不必?fù)?dān)心會有過期的試劑。我司的試劑，值得您選擇。

2.試劑的準(zhǔn)備：先將試劑盒先從冰箱中拿出來，在室溫下放置20-30 min后，再進(jìn)行測定，使試劑盒在使用前與室溫平衡，這樣做的目的能使反應(yīng)微孔內(nèi)的溫度較快地達(dá)到所需的溫度，以滿足后面的測定需求。

二、樣本

1.內(nèi)源性干擾因素：包括類風(fēng)濕因子、補(bǔ)體、高濃度的非特異球蛋白、異嗜性抗體、某些自身抗體等；

類風(fēng)濕因子的控制方法：

①用F(ab)2替代完整的IgG；

②標(biāo)本用聯(lián)有熱變性IgG的固相吸附劑處理；

③檢測抗原時，可用2-巰基乙醇加入到標(biāo)本稀釋液中使RF降解。

檢測程序：

1.  加樣：每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品 100ul ，將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 120 分鐘。

2.  洗板：用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌 4-6 次，向濾紙上印干。

3.  每孔中加入抗體工作液10 0ul 。將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 6 0 分鐘。

4.  洗板：同前。

5.  每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul 。將反應(yīng)板置 37 ℃ 3 0 分鐘。

6.  洗板：同前。

7.  每孔加入底物工作液100ul ，置 37   ℃ 暗處反應(yīng)15 分鐘。

8.  每孔加入100ul 終止液混勻。

9.  30分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀在 45 0 nm 處測 吸光值。

操作流程：

（1）待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl，每種樣品設(shè)3個平行孔；設(shè)兩個陰性對照孔，每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl；另設(shè)一個空白對照孔，加入純細(xì)胞裂解液100μl。 

（2）酶標(biāo)板置4℃，包被過夜。

（3）洗板：吸干孔內(nèi)反應(yīng)液，用洗滌液過洗一遍（將洗滌液注滿板孔后，即甩去），之后將洗滌液注滿板孔，浸泡1-2分鐘，間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。

（4）陰性對照孔每孔加入PBS 50μl，樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。 

（5）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。 

（6）洗板，同（4）。 

（7）每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。 

（8）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。 

（9）洗板，同（4）。 

（10）每孔加TMB顯色液 100μl，輕輕混勻10s，置37℃暗處反應(yīng)15-20min。 

（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。 

（12）分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，終測得的OD值為兩者之差（W1-W2），以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。

（13）數(shù)據(jù)處理：在得出標(biāo)本（S）和陰性對照（N）的 OD值后，計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標(biāo)準(zhǔn)。

豌豆根瘤 Rhizobium leguminosarumRL95-2, 內(nèi)膜腺細(xì)胞系　　ELISA Kit for Human Beta-defensin 1小鼠血紅蛋白(HB)ELISA試劑盒，英文名：HB ELISA Kit

MDA-MB-453(腺細(xì)胞)鼠李糖桿 Lactobacillus rhamnosus　　ELISA Kit for Human Protein FAM151A小鼠嗜鉻蛋白B(CHGB)ELISA試劑盒，英文名：CHGB ELISA Kit

東京根霉 Rhizopus tonkinensis蘇云金芽孢桿 Bacillus thuringiensis　　ELISA Kit for Human Phosphatidylinositol-glycan-specific phospholipase D小鼠膜鐵轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白(FPN)ELISA試劑盒，英文名：FPN ELISA Kit

美味絲葚霉 Papulaspora sapidusU14-GFP(小鼠頸細(xì)胞)　　ELISA Kit for Human High mobility group protein B1小鼠海藻糖酶(TREH)ELISA試劑盒，英文名：TREH ELISA Kit

前列腺小刺青霉 Penicillium spinulosum　　ELISA Kit for Human Heterogeneous nuclear ribonucleoprotein K小鼠單核細(xì)胞趨化蛋白5(MCP5)ELISA試劑盒，英文名：MCP5 ELISA Kit

奇異變形桿 Proteus mirabilis諾卡氏 Nocardia sp.　　ELISA Kit for Human Interferon alpha/beta receptor 2小鼠UDP葡萄糖神經(jīng)酰胺葡萄糖基轉(zhuǎn)移酶(UGCG)ELISA試劑盒，英文名：UGCG ELISA Kit

大豆慢生根瘤 Bradyrhizobium japonicum鏈霉素-青霉素(100X)　　ELISA Kit for Human KiSS-1 receptor小鼠1,25-二羥基維生素D3(DHVD3)ELISA試劑盒，英文名：DHVD3 ELISA Kit

SK-BR-3(腺細(xì)胞)MLF, 小鼠成纖維細(xì)胞　　ELISA Kit for Human Lipopolysaccharide-binding protein大鼠循環(huán)復(fù)合物(CIC)ELISA試劑盒，英文名：CIC ELISA Kit

桿屬 Lactobacillus sp.異常漢遜酵母異常變種 Hansenula anomala var. anomala　　ELISA Kit for Human Lactadherin大鼠糖原磷酸化酶同工酶BB(GP-BB)ELISA試劑盒，英文名：GP-BB ELISA Kit

根瘤豇豆慢生根瘤 Bradyrhizobium vigna　　ELISA Kit for Human Myosin-9大鼠鳥氨酸氨基甲酰轉(zhuǎn)移酶(OCT)ELISA試劑盒，英文名：OCT ELISA Kit

VB12植物維生素B12進(jìn)口ELISA試劑盒2-氯-4-硝基 英文名稱：2- chloro -4- nitro aniline 規(guī)格：：50mg 保存：：-20℃，避光

(+)兒茶素；兒茶素 英文名稱：(+) catechin; catechin 規(guī)格：：HPLC≥98% 20mg/支 保存：：-20℃，避光

20（S）-人參皂苷F2 英文名稱：20 (S) - ginsenoside F2 規(guī)格：：20mg 保存：：-20℃，避光

2-萘酚 英文: 2-Naphthol CAS號: 135-19-3  

2-萘酚 英文名稱：2- naphthol 規(guī)格：：50mg/支 保存：：-20℃，避光

 英文名稱：Phenol 規(guī)格：：100mg 保存：：-20℃，避光

2，3，5，4'—四羥基二苯乙烯-2-O 英文名稱：2, 3, 5, 4'- four hydroxy two styrene -2-O 規(guī)格：：20mg 保存：：-20℃，避光

 英文名稱：Ethanol 規(guī)格：：1ml 保存：：-20℃，避光

10-姜酚 英文名稱：10- Gingerol 規(guī)格：：HPLC≥98% 20mg/支 保存：：-20℃，避光

2,3-二氫-6-咪唑2,1-b噻唑 英文名稱：2,3- two -6- phenyl imidazo 2,1-b thiazole hydrogen 規(guī)格：：30mg 保存：：-20℃，避光