操作流程：

（1）待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl，每種樣品設(shè)3個平行孔；設(shè)兩個陰性對照孔，每孔加未處理組的細胞裂解液100μl；另設(shè)一個空白對照孔，加入純細胞裂解液100μl。 

（2）酶標(biāo)板置4℃，包被過夜。

（3）洗板：吸干孔內(nèi)反應(yīng)液，用洗滌液過洗一遍（將洗滌液注滿板孔后，即甩去），之后將洗滌液注滿板孔，浸泡1-2分鐘，間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。

（4）陰性對照孔每孔加入PBS 50μl，樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。 

（5）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。 

（6）洗板，同（4）。 

（7）每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。 

（8）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。 

（9）洗板，同（4）。 

（10）每孔加TMB顯色液 100μl，輕輕混勻10s，置37℃暗處反應(yīng)15-20min。 

（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。 

（12）分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，終測得的OD值為兩者之差（W1-W2），以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。

（13）數(shù)據(jù)處理：在得出標(biāo)本（S）和陰性對照（N）的 OD值后，計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標(biāo)準(zhǔn)。

服務(wù)：所有的檢測試劑盒均免費代測，您只需要將您準(zhǔn)備好的樣本郵寄到我司即可！本地也可以上門收取樣本！全程檢測試劑盒實驗技術(shù)指導(dǎo)，免費代做實驗。本公司產(chǎn)品僅用于科研實驗。老客戶可享受優(yōu)惠折扣服務(wù)！

產(chǎn)品名稱：RFT3核黃素轉(zhuǎn)運因子3免費代測ELISA試劑盒
英文名稱：riboflavin transporter 3,RFT3 ELISA Kit

貨號：A112700

規(guī)格：96T/48T 

保存；2-8℃。

檢測目的：用于檢測血漿，血清及相關(guān)液體等樣本。例如灌洗液、腦脊液、血清、血漿、尿液、胸腹水、細胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標(biāo)本.

檢測種屬：大鼠、小鼠、豚鼠、倉鼠、裸鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛、馬鈴薯、鹿、羊、雞、鴨、魚、人、等動植物。

實驗流程:

1. 實驗前標(biāo)準(zhǔn)品、試劑及樣本的準(zhǔn)備；

2. 加樣（標(biāo)準(zhǔn)品及樣本）100μL，37°C孵育1小時；

3. 吸棄，加檢測溶液A100μL，37°C孵育1小時；

4. 洗板3次；

5. 加檢測溶液B100μL，37°C孵育30分鐘；

6. 洗板5次；

7. 加TMB底物90μL，37°C孵育10-20分鐘；

8. 加終止液50μL，立即450nm讀數(shù)。

試劑和樣本的控制方法：

一、試劑

1.試劑的選擇：國家明確要求要采用批批檢定的形式對ELISA試劑嚴格把關(guān)，我司嚴格按照國家標(biāo)準(zhǔn)進行生產(chǎn)，已獲得國家承認的“三證”，每一個產(chǎn)品都有對應(yīng)的生產(chǎn)批號，只要客戶提前下單，我們就能為您提供新批次的產(chǎn)品，不必擔(dān)心會有過期的試劑。我司的試劑，值得您選擇。

2.試劑的準(zhǔn)備：先將試劑盒先從冰箱中拿出來，在室溫下放置20-30 min后，再進行測定，使試劑盒在使用前與室溫平衡，這樣做的目的能使反應(yīng)微孔內(nèi)的溫度較快地達到所需的溫度，以滿足后面的測定需求。

二、樣本

1.內(nèi)源性干擾因素：包括類風(fēng)濕因子、補體、高濃度的非特異球蛋白、異嗜性抗體、某些自身抗體等；

類風(fēng)濕因子的控制方法：

①用F(ab)2替代完整的IgG；

②標(biāo)本用聯(lián)有熱變性IgG的固相吸附劑處理；

③檢測抗原時，可用2-巰基乙醇加入到標(biāo)本稀釋液中使RF降解。

檢測程序：

1.  加樣：每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品 100ul ，將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 120 分鐘。

2.  洗板：用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌 4-6 次，向濾紙上印干。

3.  每孔中加入抗體工作液10 0ul 。將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 6 0 分鐘。

4.  洗板：同前。

5.  每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul 。將反應(yīng)板置 37 ℃ 3 0 分鐘。

6.  洗板：同前。

7.  每孔加入底物工作液100ul ，置 37   ℃ 暗處反應(yīng)15 分鐘。

8.  每孔加入100ul 終止液混勻。

9.  30分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀在 45 0 nm 處測 吸光值。

注意事項:

1．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標(biāo)包被板開封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。

2．濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結(jié)果。

3．各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間zui好控制在5分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。

4．  如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高（樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔*孔的OD值），請先將樣本稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測定，計算時請zui后乘以稀釋倍數(shù)（×5×n）。

5．  封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。

6．本試劑不同批號組分不得混用。顯色劑B請避光保存。

7．嚴格按照說明書的操作進行，試驗結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).

8．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。

9. 如與英文說明書有異，以英文說明書為準(zhǔn)

中國倉鼠肺細胞大鼠平滑肌細胞完全培養(yǎng)基　　人上皮細胞盤狀結(jié)構(gòu)域受體1 ELISA試劑盒人96T0.156-10 ng/mL小鼠組織金屬蛋白酶抑制因子3(TIMP3)ELISA試劑盒，英文名：TIMP3 ELISA Kit

小鼠腸上皮細胞完全培養(yǎng)基釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae　　ELISA Kit for Human Dopamine beta-hydroxylase小鼠胰淀粉酶α2(AMY2)ELISA試劑盒，英文名：AMY2 ELISA Kit

平山正青霉 Eupenicillium hirayamae涇陽鏈霉 Streptomyces jingyangensis　　人彈性蛋白(Elastin)ELISA試劑盒人96T0.625-40 ng/mL小鼠無翅型MMTV整合位點家族成員5A(WNT5A)ELISA試劑盒，英文名：WNT5A ELISA Kit

費氏中華根瘤 Sinorhizobium frediiPC-12(大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤細胞)　　ELISA Kit for Human N-formyl peptide receptor 2小鼠神經(jīng)源素3(NEUROG3)ELISA試劑盒，英文名：NEUROG3 ELISA Kit

NAMALWA(Burkitt's瘤細胞)植物桿 Lactobacillus plantarum　　人酸性成纖維細胞生長因子1(aFGF-1)ELISA試劑盒人96T62.5-4000 pg/mL小鼠鎳紋蛋白(METRN)ELISA試劑盒，英文名：METRN ELISA Kit

沙地青霉 Penicillium arenicola苜蓿中華根瘤 Sinorhizobium meliloti　　ELISA Kit for Human Glypican-2小鼠腱蛋白樣蛋白2(CHRDL2)ELISA試劑盒，英文名：CHRDL2 ELISA Kit

草菇 Volvariella bombycinaNIH/3T3(小鼠胚胎細胞)　　人細胞質(zhì)組氨酰(Histidyl-tRNA synthetase, cytoplasmic) ELISA試劑盒人96T0.156-10 ng/mL小鼠骨骼肌快肌肌鈣蛋白I(TNNI2)ELISA試劑盒，英文名：TNNI2 ELISA Kit

小鼠胚胎成纖維細胞嗜酸桿 Lactobacillus acidophilus　　ELISA Kit for Human Glycosylated hemoglobin A1c小鼠碘甲腺原氨酸脫碘酶Ⅲ(DIO3)ELISA試劑盒，英文名：DIO3 ELISA Kit

大鼠尿道上皮細胞完全培養(yǎng)基日本根霉　　人整合素β1，ITG β1 ELISA試劑盒人96T15.6-1000 pg/mL小鼠白介素8受體α(IL8Rα)ELISA試劑盒，英文名：IL8Rα ELISA Kit

土曲霉 Aspergillus terreus結(jié)腸細胞　　ELISA Kit for Human Islet amyloid polypeptide小鼠S100鈣結(jié)合蛋白A8(S100A8)ELISA試劑盒，英文名：S100A8 ELISA Kit

RFT3核黃素轉(zhuǎn)運因子3免費代測ELISA試劑盒APBA3/Mint3/X11gamma  β淀粉樣前體蛋白結(jié)合蛋白3抗體 規(guī)格: 0.2ml

APBB1/Fe65 protein  鐵蛋白Fe65抗體 規(guī)格: 0.1ml

APC/Adenomatous Polyposis Coli  瘤樣息肉抗體 規(guī)格: 0.1mlBRRN1/CAPH  染色體相關(guān)蛋白H抗體 規(guī)格: 0.2ml

APC5  細胞分裂周期蛋白5抗體 規(guī)格: 0.2mlFAM98B  FAM98B蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml

APC6/CDC16  細胞分裂周期蛋白16抗體 規(guī)格: 0.2ml

APE/Girdin  肌動蛋白結(jié)合蛋白Girdin抗體 規(guī)格: 0.1ml

Apelin receptor/AGTRL1  管緊素樣蛋白1抗體 規(guī)格: 0.2ml

Apelin/Apelin 13  脂肪炎癥因子Apelin抗體 規(guī)格: 0.1ml

Apg10  自噬相關(guān)蛋白10抗體 規(guī)格: 0.2ml

Apg12  自噬相關(guān)蛋白12抗體 規(guī)格: 0.2ml