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產(chǎn)品名稱：SPG11痙攣性截癱蛋白11檢測試劑盒
英文名稱：Spastic Paraplegia 11(SPG11)ELISA Kit

貨號(hào)：A102314

規(guī)格：96T/48T 

保存；2-8℃。

檢測目的：用于檢測血漿，血清及相關(guān)液體等樣本。例如灌洗液、腦脊液、血清、血漿、尿液、胸腹水、細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標(biāo)本.

檢測種屬：大鼠、小鼠、豚鼠、倉鼠、裸鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛、馬鈴薯、鹿、羊、雞、鴨、魚、人、等動(dòng)植物。

實(shí)驗(yàn)流程:

1. 實(shí)驗(yàn)前標(biāo)準(zhǔn)品、試劑及樣本的準(zhǔn)備；

2. 加樣（標(biāo)準(zhǔn)品及樣本）100μL，37°C孵育1小時(shí)；

3. 吸棄，加檢測溶液A100μL，37°C孵育1小時(shí)；

4. 洗板3次；

5. 加檢測溶液B100μL，37°C孵育30分鐘；

6. 洗板5次；

7. 加TMB底物90μL，37°C孵育10-20分鐘；

8. 加終止液50μL，立即450nm讀數(shù)。

試劑和樣本的控制方法：

一、試劑

1.試劑的選擇：國家明確要求要采用批批檢定的形式對(duì)ELISA試劑嚴(yán)格把關(guān)，我司嚴(yán)格按照國家標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行生產(chǎn)，已獲得國家承認(rèn)的“三證”，每一個(gè)產(chǎn)品都有對(duì)應(yīng)的生產(chǎn)批號(hào)，只要客戶提前下單，我們就能為您提供新批次的產(chǎn)品，不必?fù)?dān)心會(huì)有過期的試劑。我司的試劑，值得您選擇。

2.試劑的準(zhǔn)備：先將試劑盒先從冰箱中拿出來，在室溫下放置20-30 min后，再進(jìn)行測定，使試劑盒在使用前與室溫平衡，這樣做的目的能使反應(yīng)微孔內(nèi)的溫度較快地達(dá)到所需的溫度，以滿足后面的測定需求。

二、樣本

1.內(nèi)源性干擾因素：包括類風(fēng)濕因子、補(bǔ)體、高濃度的非特異球蛋白、異嗜性抗體、某些自身抗體等；

類風(fēng)濕因子的控制方法：

①用F(ab)2替代完整的IgG；

②標(biāo)本用聯(lián)有熱變性IgG的固相吸附劑處理；

③檢測抗原時(shí)，可用2-巰基乙醇加入到標(biāo)本稀釋液中使RF降解。

檢測程序：

1.  加樣：每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品 100ul ，將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 120 分鐘。

2.  洗板：用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌 4-6 次，向?yàn)V紙上印干。

3.  每孔中加入抗體工作液10 0ul 。將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 6 0 分鐘。

4.  洗板：同前。

5.  每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul 。將反應(yīng)板置 37 ℃ 3 0 分鐘。

6.  洗板：同前。

7.  每孔加入底物工作液100ul ，置 37   ℃ 暗處反應(yīng)15 分鐘。

8.  每孔加入100ul 終止液混勻。

9.  30分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀在 45 0 nm 處測 吸光值。

注意事項(xiàng):

1．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標(biāo)包被板開封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。

2．濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出，稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶，洗滌時(shí)不影響結(jié)果。

3．各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性，以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間zui好控制在5分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。

4．  如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高（樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔*孔的OD值），請(qǐng)先將樣本稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測定，計(jì)算時(shí)請(qǐng)zui后乘以稀釋倍數(shù)（×5×n）。

5．  封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。

6．本試劑不同批號(hào)組分不得混用。顯色劑B請(qǐng)避光保存。

7．嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行，試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).

8．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。

9. 如與英文說明書有異，以英文說明書為準(zhǔn)

Sf-21(昆蟲細(xì)胞)大鼠腸微血管細(xì)胞完全培養(yǎng)基　　ELISA Kit for Human Microtubule-associated proteins 1A/1B light chain 3A大鼠天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)ELISA試劑盒，英文名：AST ELISA Kit

桿屬 Lactobacillus sp.熱帶假絲酵母 Candida tropicalis　　ELISA Kit for Human Metallothionein-1E大鼠尿激酶型纖溶酶原激活物(uPA)ELISA試劑盒，英文名：uPA ELISA Kit

根瘤地衣芽孢桿 Bacillus licheniformis　　ELISA Kit for Human Pro-neuropeptide Y大鼠角化細(xì)胞生長因子(KGF)ELISA試劑盒，英文名：KGF ELISA Kit

U251(膠質(zhì)瘤細(xì)胞)膠凍樣芽胞桿 Bacillus mucilaginosus　　ELISA Kit for Human Pregnancy-specific beta-1-glycoprotein 11大鼠肝X受體α(LXRα)ELISA試劑盒，英文名：LXRα ELISA Kit

日本根霉 Rhizopus japonicusII型膠原酶(含100mL酶解緩沖液)　　ELISA Kit for Human 5'-AMP-activated protein kinase subunit beta-1大鼠白介素6(IL-6)ELISA試劑盒，英文名：IL-6 ELISA Kit

雪腐鐮孢橢圓釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae var.ellipsoideus　　ELISA Kit for Human Serum paraoxonase/arylesterase 1大鼠B細(xì)胞κ輕肽基因增強(qiáng)子核因子抑制因子α(NFKBIA)ELISA試劑盒，英文名：NFKBIA ELISA Kit

枯草芽胞桿 Bacillus subtilis嗜線蟲致病桿 Xenorhabdus nematophila　　ELISA Kit for Human Neuronal-specific septin-3大鼠載脂蛋白A4(APOA4)ELISA試劑盒，英文名：APOA4 ELISA Kit

Hep G2(肝細(xì)胞)BxPC-3(原位胰腺腺細(xì)胞)　　ELISA Kit for Human Syndecan-1大鼠糖皮質(zhì)誘導(dǎo)腫瘤壞死因子受體(GITR)ELISA試劑盒，英文名：GITR ELISA Kit

酸球 Lactococcus lactis地衣芽孢桿 Bacillus licheniformis　　ELISA Kit for Human Saitohin大鼠母系胚胎亮氨酸拉鏈蛋白激酶(MELK)ELISA試劑盒，英文名：MELK ELISA Kit

苜蓿中華根瘤三葉草根瘤 Rhizobium trifolii　　ELISA Kit for Human Telomerase reverse transcriptase大鼠歸巢關(guān)聯(lián)細(xì)胞黏附分子(HCAM)ELISA試劑盒，英文名：HCAM ELISA Kit

SPG11痙攣性截癱蛋白11檢測試劑盒ASMTL  ASMTL蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml

ASMTY/HIOMT  松果體N甲基乙酰羥色胺抗體 規(guī)格: 0.2ml

Aspartate Aminotransferase  谷草轉(zhuǎn)氨酶抗體 規(guī)格: 0.2mlGoat Anti-human IgG/HRP  辣根過氧化物酶標(biāo)記的羊抗人IgG 規(guī)格: 0.1ml

ASPP1  p53凋亡刺激蛋白1抗體 規(guī)格: 0.1ml

ASPP2/p53BP2  P53凋亡刺激蛋白2抗體 規(guī)格: 0.1ml

ASTN2  星形肌動(dòng)蛋白抗體 規(guī)格: 0.2mlPhospho-BAP1(Ser592)  磷酸化易感基因1抗體(人) 規(guī)格: 0.1ml

Astrocyte  人星形膠質(zhì)細(xì)胞抗體 規(guī)格: 0.2mlSLC16A3/MCT4  單羧酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白3/4抗體 規(guī)格: 0.2ml

ASZ1  錨定蛋白樣蛋白1抗體 規(guī)格: 0.2ml

AT1R/AGTR1  管緊張素Ⅱ-1型受體抗體 規(guī)格: 0.1ml

AT2R/AT1  管緊張素Ⅱ受體1抗體 規(guī)格: 0.2ml

操作流程：

（1）待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl，每種樣品設(shè)3個(gè)平行孔；設(shè)兩個(gè)陰性對(duì)照孔，每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl；另設(shè)一個(gè)空白對(duì)照孔，加入純細(xì)胞裂解液100μl。 

（2）酶標(biāo)板置4℃，包被過夜。

（3）洗板：吸干孔內(nèi)反應(yīng)液，用洗滌液過洗一遍（將洗滌液注滿板孔后，即甩去），之后將洗滌液注滿板孔，浸泡1-2分鐘，間歇搖動(dòng)。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。

（4）陰性對(duì)照孔每孔加入PBS 50μl，樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。 

（5）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。 

（6）洗板，同（4）。 

（7）每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。 

（8）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。 

（9）洗板，同（4）。 

（10）每孔加TMB顯色液 100μl，輕輕混勻10s，置37℃暗處反應(yīng)15-20min。 

（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。 

（12）分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，終測得的OD值為兩者之差（W1-W2），以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。

（13）數(shù)據(jù)處理：在得出標(biāo)本（S）和陰性對(duì)照（N）的 OD值后，計(jì)算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標(biāo)準(zhǔn)。