操作流程：

（1）待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl，每種樣品設3個平行孔；設兩個陰性對照孔，每孔加未處理組的細胞裂解液100μl；另設一個空白對照孔，加入純細胞裂解液100μl。 

（2）酶標板置4℃，包被過夜。

（3）洗板：吸干孔內(nèi)反應液，用洗滌液過洗一遍（將洗滌液注滿板孔后，即甩去），之后將洗滌液注滿板孔，浸泡1-2分鐘，間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復洗滌3-4次。

（4）陰性對照孔每孔加入PBS 50μl，樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。 

（5）酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。 

（6）洗板，同（4）。 

（7）每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。 

（8）酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。 

（9）洗板，同（4）。 

（10）每孔加TMB顯色液 100μl，輕輕混勻10s，置37℃暗處反應15-20min。 

（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應。 

（12）分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，終測得的OD值為兩者之差（W1-W2），以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。

（13）數(shù)據(jù)處理：在得出標本（S）和陰性對照（N）的 OD值后，計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標準。

服務：所有的檢測試劑盒均免費代測，您只需要將您準備好的樣本郵寄到我司即可！本地也可以上門收取樣本！全程檢測試劑盒實驗技術指導，免費代做實驗。本公司產(chǎn)品僅用于科研實驗。老客戶可享受優(yōu)惠折扣服務！

產(chǎn)品名稱：凝血因子Ⅷ試劑盒

貨號：FS-016348

規(guī)格：96T/48T 

保存；2-8℃。

檢測目的：用于檢測血漿，血清及相關液體等樣本。例如灌洗液、腦脊液、血清、血漿、尿液、胸腹水、細胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標本.

檢測種屬：大鼠、小鼠、豚鼠、倉鼠、裸鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛、馬鈴薯、鹿、羊、雞、鴨、魚、人、等動植物。

實驗流程:

1. 實驗前標準品、試劑及樣本的準備；

2. 加樣（標準品及樣本）100μL，37°C孵育1小時；

3. 吸棄，加檢測溶液A100μL，37°C孵育1小時；

4. 洗板3次；

5. 加檢測溶液B100μL，37°C孵育30分鐘；

6. 洗板5次；

7. 加TMB底物90μL，37°C孵育10-20分鐘；

8. 加終止液50μL，立即450nm讀數(shù)。

試劑和樣本的控制方法：

一、試劑

1.試劑的選擇：國家明確要求要采用批批檢定的形式對ELISA試劑嚴格把關，我司嚴格按照國家標準進行生產(chǎn)，已獲得國家承認的“三證”，每一個產(chǎn)品都有對應的生產(chǎn)批號，只要客戶提前下單，我們就能為您提供新批次的產(chǎn)品，不必擔心會有過期的試劑。我司的試劑，值得您選擇。

2.試劑的準備：先將試劑盒先從冰箱中拿出來，在室溫下放置20-30 min后，再進行測定，使試劑盒在使用前與室溫平衡，這樣做的目的能使反應微孔內(nèi)的溫度較快地達到所需的溫度，以滿足后面的測定需求。

二、樣本

1.內(nèi)源性干擾因素：包括類風濕因子、補體、高濃度的非特異球蛋白、異嗜性抗體、某些自身抗體等；

類風濕因子的控制方法：

①用F(ab)2替代完整的IgG；

②標本用聯(lián)有熱變性IgG的固相吸附劑處理；

③檢測抗原時，可用2-巰基乙醇加入到標本稀釋液中使RF降解。

檢測程序：

1.  加樣：每孔各加入標準品或待測樣品 100ul ，將反應板充分混勻后置 37 ℃ 120 分鐘。

2.  洗板：用洗滌液將反應板充分洗滌 4-6 次，向濾紙上印干。

3.  每孔中加入抗體工作液10 0ul 。將反應板充分混勻后置 37 ℃ 6 0 分鐘。

4.  洗板：同前。

5.  每孔加酶標抗體工作液100ul 。將反應板置 37 ℃ 3 0 分鐘。

6.  洗板：同前。

7.  每孔加入底物工作液100ul ，置 37   ℃ 暗處反應15 分鐘。

8.  每孔加入100ul 終止液混勻。

9.  30分鐘內(nèi)用酶標儀在 45 0 nm 處測 吸光值。

注意事項:

1．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標包被板開封后如未用完，板條應裝入密封袋中保存。

2．濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結(jié)果。

3．各步加樣均應使用加樣器，并經(jīng)常校對其準確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間zui好控制在5分鐘內(nèi)，如標本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。

4．  如標本中待測物質(zhì)含量過高（樣本OD值大于標準品孔*孔的OD值），請先將樣本稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測定，計算時請zui后乘以稀釋倍數(shù)（×5×n）。

5．  封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。

6．本試劑不同批號組分不得混用。顯色劑B請避光保存。

7．嚴格按照說明書的操作進行，試驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.

8．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。

9. 如與英文說明書有異，以英文說明書為準

"1g 溴甲酚綠 Bromocresol Green Sodium Salt 室溫保存
5g 溴甲酚紫 Bromocresol Purple 室溫保存
5g 溴酚藍 Bromophenol Blue 室溫干燥保存
5g 二甲基砷酸鈉 Cacodylic Acid Sodium Salt 室溫干燥保存
1g 丁酸鈉 Butyric Acid Sodium Salt 室溫干燥保存
100g 氯化鈣，二水 Calcium Chloride, Dihydrate 室溫干燥保存
1mg 鈣離子載體 Calcium Ionophore A23187 室溫避光保存
100mL 加拿大樹膠 Canada Balsam 室溫避光保存
10g 3-(環(huán)己胺)-1-丙磺酸 CAPS 室溫干燥保存
1g  Carbenicillin Disodium Salt 4℃保存
25mg 6- 羧基二乙酸熒光素 6-Carboxyflucrescein Diacetate -20℃保存
25g 羧甲基纖維素鈉鹽 Carboxymethylcellulose Sodium Salt 常溫保存
1g 洋紅 Carmine 室溫干燥避光保存
人 H2AFV 基因全長ORF克隆
elisa試劑盒質(zhì)量人 SUB1 基因全長ORF克隆
人 HIST1H2BK 基因全長ORF克隆
人 CRB3 基因全長ORF克隆
人 LYRM1 基因全長ORF克隆
人 MAP1LC3A 基因全長ORF克隆
人 ENSA 基因全長ORF克隆
人 VAMP2 基因全長ORF克隆
人 RBX1 基因全長ORF克隆
人 MCM6 基因全長ORF克隆
人 COX16 基因全長ORF克隆"